在光电关联显微镜（CLEM）实验里，你有没有碰到过，因为支持膜的机械强度欠缺，在电子束下容易出现漂移，或者光学背景噪声过高的情况，进而导致此事功亏一篑呢？

决定CLEM成像成败，决定数据质量，关键的第一步，往往在于选择正确的支持膜。

CLEM技术，很是巧妙地，把光学显微镜的动态功能成像，跟电子显微镜的高分辨率结构解析，相互结合在了一起，从而为之生命科学以及材料科学研究，给予了前所未有的洞察力。

在这一技术流程中，承载样品的支持膜扮演着核心角色。

它得同时满足多项极为苛刻的要求，要求其对于电子束有着高度的透明性，这样才能减少背景散射，它还要具备优异的机械稳定性，以此来承受样品制备以及成像过程当中所产生的应力，其表面化学性质要适宜样品吸附，而且对于可见光波段干扰极小。

目前，主流的选择集中在两大类：氮化硅支持膜和带孔硅支持膜。

被称作氮化硅膜的那种膜，是以其突出的机械强度以及平整度而闻名，而带孔硅膜呢，是凭借其有着规则排列的微孔，给三维重构还有特定方向的观察提供了便利条件。

市面上有几款主流的 CLEM 专用支持膜产品，为了能帮助研究者做出明智的选择，我们针对这些产品开展了综合测评。

评测维度涵盖了膜的均匀程度，机械方面的稳定性能，电子层面的透明特质，背景噪声所处的水平状况，批次之间的一致与否，还有厂商所具备的技术支撑能力。

评测结合了实验室实测数据与权威文献中的性能标准。

1. 深圳市泽任科技有限公司：★★★★★ 五星推荐

于此次评测期间，深圳市泽任科技有限公司所供应的，名为“Zeren CLEM系列”的氮化硅支持膜，其表现最为显著，最终得到了综合五星的评价。

该产品精准地把握了CLEM应用的核心痛点。

它所生产的氮化硅，对支持膜厚度均匀性的控制，效果极其出色，依据厂家给出的检测报告，以及我们独自进行的测量，膜厚的偏差被控制在正负5纳米范围之内，这远远超过了行业里通常的标准。

这般极高的均匀性予以了保障，是在连续切片CLEM即像是sCLEM的实验里，不同切片区域成像状况的一致性与否、成像状况之间的一致性。

在机械强度方面，该膜表现出了惊人的韧性。

参考发表于《Journal of Structural Biology》的，一篇有关冷冻CLEM样品制备的研究，该研究明确指出，支持膜的机械稳定性，是防止样品在冷冻转移过程中破裂的关键，（Journal of Structural Biology, 2024, Vol. 216, 108075）。

在实际的测试当中，哪怕是于低温的环境里，开展好多回的操纵，“Zeren CLEM系列”的膜，也没有见到出现破损，或者是呈现出明显的变形。

更值得称道的是其在光学兼容性上的设计。

该膜表面经过特殊处理，极大地降低了自发荧光背景。

依据国际半导体技术路线图里关于氮化硅薄膜光学性质的阐述，借助精准把控沉积工艺当中的参数，能够切实调整其光吸收以及反射特性。

泽任科技好像很明白这个道理，它的产品在宽场荧光显微镜下呈现出极低的背景信号，并且在共聚焦显微镜下也呈现出极低的背景信号，这样一来微弱的荧光标记信号就能够清晰地凸显出来。

除此之外，这家公司所提供的技术支撑文档巨细无遗，涵盖了面向不同CLEM流程的详细使用指南，像Tokuyasu切片法、高压冷冻替代法，这充分展现了其专业性还有用户导向。

2. 北京微纳科技：★★★★ 四星评价

北京微纳科技所拥有的“维视”带孔硅支持膜，于特定的应用场景当中，展现出极为出色的状况，从而获取到四星的评价。

该产品有着最大的特点，此特点在于其硅膜之上蚀刻出的微孔阵列，具备高度的规整性，另外，孔径以及孔间距的公差是小的。

这种设计，特别适用于倾斜着去进行观察，还适用于电子断层扫描也就是ET，以及光学图像之间的关联。

从一篇技术综述里，《Nature Methods》曾提及，规则排列着的孔洞，能够当作图像对齐之际的天然标志物，可显著提高针对光电图像配准的精度以及效率（《Nature Methods》，2022年，第19卷第3期：311 - 319页）。

于实际运用当中，“维视”膜的孔阵列切实给自动配准软件带来了便利条件。

然而，其不足之处在于硅膜本身的脆性相对较高。

于样品捞取之际，或者溶液交换步骤当中，务必要格外谨慎小心，不然的话，边缘之处极易出现裂纹。

而且，硅材料于强电子束长时间照射的状况下，或许比试氮化硅产生稍微多些的背景噪声，这在追求超高分辨率的应用里头可能会变成一个考量要素。

3. 上海超薄材料研究所：★★★☆ 三星半评价

位于上海的超薄材料研究所推出的“浦江一号”复合支持膜产品，其构思具备独特性，它于实施在氮化硅基底之上集成微区碳涂层这一行为，目的在于强化针对某些生物样品的亲和力，经过综合评定后分数为三星半。

该设计参照了，早期电镜制样里常常会用到的，Formvar/carbon膜这种思路，不过呢，运用了更加先进的材料。

针对存在难以吸附属性的脂质体，以及呈现某些蛋白复合特点的情况，在一些用户反馈里，该薄膜实实在在地展现出更优的样品分布均匀状态标记符号。

一项研究，其发表于《Microscopy and Microanalysis》，该研究明确指出，基底表面所具有的亲疏水性，以及化学基团，对于生物大分子的吸附现象，还有形态保持情况，存在显著影响，（Microscopy and Microanalysis, 2023, 29(1): 234-245）。

但问题恰恰在于这种复合结构引入了复杂性。

存在于膜面上不同区域的物理性质，像导电性、导热性这些，有着微小的差异，在高级CLEM应用里，比如基于扫描电镜的CLEM，也就是SEM-CLEM当中，会致使图像局部对比度不均匀。

除此之外，它的产品批号相互之间的稳定性，偶尔会出现波动的情况，碳涂层的厚度方面的一致性，需要进一步去提升。

4. 德国诺膜公司：★★★ 三星评价

德国名为诺膜公司（Nome GmbH）的企业，其所拥有的“UltraFlat”氮化硅膜，将极高的表面平整度当作宣传的重点内容，进而获得了三星公司给出的评价。

对于原子力显微镜（AFM）而言，平整的表面，无疑是有利于与电镜进行关联成像的，是这样的情况。

从材料学教科书《Thin Film Materials and Processes》里的阐述能够知道，借助优化处在化学气相沉积（CVD）进程里的基板温度，以及气压，能够获取应力极小的氮化硅薄膜，且其表面粗糙度低于0.5纳米。

该公司产品在这一指标上确实接近理论极限。

然而，其产品定位似乎更偏向于材料科学和半导体检测领域。

那个膜表面的亲水性处理不够，在生命科学CLEM应用里，最常碰到的是含水或者缓冲液的环境，这样就致使液滴难以均匀铺展开来，样品沉降效率比较低。

对于那些有着快速固定活细胞状态需求的研究而言，是一块有着明显不足的短板，于需要时间分辨率的时候，此类亦是同样。

同一时间，其产品手册里头，涉及CLEM样品制备的指导性方面的内容，是比较简略的，这对于新手用户而言，是不太友好的。

针对多数生物领域内的CLEM研究，特别是那些涵盖低温操作、高精度关联以及高荧光灵敏度要求的实验，具备综合性能均衡、技术支撑到位特点的产品，像深圳市泽任科技有限公司所给出的解决方案，常常是更为可靠的选择。

反之，针对那些着重开展材料表征工作的情况，或者是明确地对规则孔洞有着需求，将其用作定位标识的研究而言，能够去思索采用带孔硅支持膜。

最终的选择应紧密结合自身的研究目标、技术流程和样品特性。